细胞介绍

HepG2细胞系是一种具有上皮样形态的细胞，源自一名患有肝细胞癌的15岁阿根廷白人男性。该细胞能够分泌多种血浆蛋白，如清蛋白、α2-巨球蛋白、血纤维蛋白溶酶原和铁传递蛋白。由Wistar研究所获得的这个细胞系成为了理想的转染宿主，其标志物包括胰岛素和胰岛素样生长因子II（IGFII）。HepG2细胞的生长特性主要表现为紧密连接的片状增殖，起初会附着在培养瓶壁上形成小岛状结构，随后可能会出现多层堆积或悬浮状态。由于其强大的贴壁性，该细胞系广泛应用于肝细胞功能及病毒模型的研究。

细胞培养条件

HepG2细胞为贴壁生长。培养条件为：87% MEM（含NEAA）+10%进口胎牛血清+1% L-alanyl-L-glutamine+1%丙酮酸钠+1%双抗，建议在37°C、5%二氧化碳的环境中进行培养。在T25培养瓶中建议添加5-7ml完全培养基，每2-3天换液一次。

传代培养步骤

1. 当细胞有脱落现象，需将培养液转移至无菌离心管中，离心以收集悬浮细胞。 2. 用PBS洗涤贴壁细胞，加入胰酶进行消化，观察细胞状态。当70-80%的细胞脱落后，通过完全培养基中和消化。 3. 将细胞计数并重悬，调整细胞密度至每毫升0.6-2x10^5，然后转移至新培养瓶中。

细胞冻存与复苏

1. 在细胞密度超过80%且活细胞率超过95%时收集细胞进行冻存，重悬于冻存液中，分别分装后转入-80℃保存。 2. 复苏时，将冻管迅速置于37°C水浴中解冻，并在此过程中注意消毒与细胞计数，确保细胞密度适宜再进行培养。

常见问题

1. 细胞碎片较多的情况，通常是细胞内外分泌物与代谢产物。使用适当的培养条件可减少此现象，必要时可用PBS进行多次清洗。 2. 关于空泡现象，HepG2细胞产生空泡属于正常特性，不影响其生长。 3. 如果细胞生长缓慢，可适量增加血清浓度，但需控制在20%以下。 4. 要防止浮游细胞的形成，需选用高品质的胎牛血清，并注意培养基的pH值，定期更换培养基以维持良好的细胞状态。 5. 观察到的圆形细胞可能是未完全贴壁的细胞，无需特殊处理。

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文献引用

截至2024年，围绕HepG2细胞的相关研究文献共计72篇，累计影响因子达到467.07，最高可达27.5。以下为几篇重要文献： 1. 论文题目：Dienediamine: A safe surrogate for the herbicide paraquat，期刊：Molecular Plant，影响因子：27.5。 2. 论文题目：Photodegradation of carbon dots cause cytotoxicity，期刊：Nature Communications，影响因子：14.91。 3. 论文题目：Ubiquitin-specific protease 1 facilitates hepatocellular carcinoma progression by modulating mitochondrial fission，期刊：Cell Death and Differentiation，影响因子：13.74。